具体而言,为了表征与叶蝉适应相关的基因组特征,研究聚焦于三种代表性叶蝉物种——电光叶蝉(Recilia dorsalis)、黑尾叶蝉(Nephotettix cincticeps)和二条黑尾叶蝉(Nephotettix nigropictus),组装了染色体水平的参考基因组。跨物种比较显示,三种叶蝉中均存在胆固醇依赖的细胞溶素(CDC)基因家族(图1)。该家族具有靶向真核生物细胞膜的穿孔活性,此前仅在细菌中被发现,提示叶蝉基因可能源于细菌供体的水平转移。
系统发育分析显示叶蝉CDC基因与革兰氏阳性细菌经典CDC分支聚类,支持细菌向叶蝉的水平转移事件(图2)。数据库检索表明转移可能发生于角顶叶蝉亚科共同祖先。此外,叶蝉CDC基因存在内含子结构,密码子使用偏好与保守叶蝉基因相似,提示其在受体基因组中发生了驯化。同时,部分CDC拷贝检测到正选择信号,且保守功能位点发生了突变,提示可能发生了序列和功能分化。
因此,研究选取了电光叶蝉的三个代表性基因表征了其生化性质。与细菌CDC类似,保守的RdCDC3具有强胆固醇结合能力及高细胞毒性。相比之下,RdCDC6两种能力均相对较弱;而积累大量突变的RdCDC9则完全丧失了细胞毒性(图3)。
进一步分析显示,高毒性的RdCDC3主要在卵巢和卵中表达,并特异性表达于卵壳,提示其可能作为防御武器保护叶蝉后代。因此,研究通过体外和体内实验,评估了其对叶蝉天敌——稻红瓢虫的影响。结果表明,饲喂抑制RdCDC3表达的卵,瓢虫体重相比对照组显著提高,表明RdCDC3表达能够有效减少瓢虫对叶蝉卵的取食和利用(图4)。
另一方面,无毒的RdCDC9则主要表达于肠道。沉默RdCDC9后,叶蝉体重、存活率和产卵量均显著下降,表明其获得了新的生物学功能。研究进一步关注了叶蝉的肠道微生物组成。沉默RdCDC9后,群落丰富度和多样性无显著差异,但潜在致病菌丰度升高,而内共生菌丰度降低;同时,多个毒力因子相关基因丰度显著增加(图5),提示RdCDC9可能有助于维持叶蝉肠道菌群稳态,进而促进叶蝉的生存与繁殖。
综上所述,研究系统解析了水平转移来源的昆虫基因功能,揭示了外源基因的序列、结构和功能驯化与多样化,支持水平基因转移作为促进昆虫适应的重要驱动力量(图6)。